隨著新冠疫情在全球的快速蔓延，檢測快速，操作簡單的POCT（point-of-care testing，即時檢測）備受大家關(guān)注。除了傳統(tǒng)的膠體金技術(shù)外，分子POCT也逐漸為人所知。例如國外雅培IDNOW（前Alere i平臺，2017年被雅培收購），新冠病毒陽性結(jié)果最快可在5分鐘內(nèi)獲得，陰性結(jié)果可在13分鐘內(nèi)確認(rèn)，備受輿論關(guān)注。其它傳統(tǒng)分子POC列強(qiáng)如丹納赫旗下塞沛的GeneXpert，梅里埃的FilmArray，Biocartis的Idylla亦相繼推出或宣布研發(fā)針對COVID-19的快速分子檢測。國內(nèi)企業(yè)如優(yōu)思達(dá)、卡尤迪、奧然生物、萬孚倍特等也借此風(fēng)口陸續(xù)推出相關(guān)產(chǎn)品。
喜訊！奧然全自動全密封熒光PCR一體機(jī)獲NMPA批準(zhǔn)上市
卡尤迪生物新冠檢測儀器與試劑獲國家藥監(jiān)局注冊證，實現(xiàn)30分鐘出結(jié)果
今年5月7日，中共中央政治局常委、國務(wù)院總理、中央應(yīng)對新冠肺炎疫情工作領(lǐng)導(dǎo)小組組長李克強(qiáng)主持召開領(lǐng)導(dǎo)小組會議，會議要求，要進(jìn)一步集中力量重點(diǎn)攻關(guān)，加快提高核酸檢測能力，尤其是推進(jìn)檢測時間短、且無需實驗室的核酸快速檢測設(shè)備生產(chǎn)擴(kuò)能，加大政策、審評審批等支持等。那么POC分子診斷目前還需要在傳統(tǒng)普通PCR實驗室開展嗎？
近日，為指導(dǎo)醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)檢驗實驗室建設(shè)，推進(jìn)《公共衛(wèi)生防控救治能力建設(shè)方案》實施，國家衛(wèi)生健康委、國家發(fā)展改革委制定了《醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)檢驗實驗室建筑技術(shù)導(dǎo)則（試行）》。該《導(dǎo)則》第七條規(guī)定：“核酸檢測實驗室可分為試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本制備區(qū)、核酸擴(kuò)增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū)。結(jié)合實際，采用集中布置或分散布置形式，并配套設(shè)置洗消設(shè)施。當(dāng)采用實時熒光定量PCR儀時，核酸擴(kuò)增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū)可合并為一區(qū)。當(dāng)采用一體化自動化核酸分析設(shè)備時，樣本制備區(qū)、核酸擴(kuò)增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū)可合并為一區(qū)。”
那是不是POC分子診斷就不需要在PCR實驗室開展了呢？其實該規(guī)定在2010年原衛(wèi)生部頒布的《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗實驗室管理辦法》的附件《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗實驗室工作導(dǎo)則》就有相關(guān)體現(xiàn)：“原則上臨床基因擴(kuò)增檢驗實驗室應(yīng)當(dāng)設(shè)置以下區(qū)域：試劑儲存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。這4個區(qū)域在物理空間上必須是完全相互獨(dú)立的，各區(qū)域無論是在空間上還是在使用中，應(yīng)當(dāng)始終處于完全的分隔狀態(tài)，不能有空氣的直接相通。根據(jù)使用儀器的功能，區(qū)域可適當(dāng)合并。例如使用實時熒光PCR儀，擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)可合并；采用樣本處理、核酸提取及擴(kuò)增檢測為一體的自動化分析儀，則標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)可合并。”不過《醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)檢驗實驗室建筑技術(shù)導(dǎo)則（試行）》首次使用了“一體化自動化核酸分析設(shè)備”的概念。
之前較早公開的《病原微生物核酸擴(kuò)增檢驗實驗室能力通用要求行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)（征求意見稿）》，則將按實驗室活動和儀器類型的不同，實驗室可分為普通PCR實驗室、全自動定量PCR實驗室、一體自動化分析PCR實驗室、其他涉及核酸擴(kuò)增的實驗室等。其中同樣明確規(guī)定一體化自動化分析PCR實驗室通常設(shè)置二個工作區(qū)，即試劑準(zhǔn)備區(qū)和自動檢測區(qū)。與上述法規(guī)要求一致。
綜合以上文件可以看出，涉及PCR的POC分子診斷仍需要在經(jīng)認(rèn)證的PCR實驗室開展，但是POC分子診斷不需要傳統(tǒng)普通PCR實驗室的三間房或四間房，只需要設(shè)置試劑準(zhǔn)備區(qū)和自動檢測區(qū)兩個分區(qū)即可。相比傳統(tǒng)普遍PCR實驗室的四個或三個分區(qū)，降低了空間要求，同時減少了配套設(shè)備要求。讓更多中小實驗室能夠開展分子檢測，提高基層公共衛(wèi)生防控救治能力。
但是對于像賽沛的GeneXpert，Biocartis的Idylla等采用封閉式卡盒設(shè)計的產(chǎn)品，人工只需要簡單加樣，所有樣本處理、核酸提取、PCR擴(kuò)增和數(shù)據(jù)分析全由儀器自動完成。這時候試劑準(zhǔn)備區(qū)僅有儲存檢測盒的功能，樣本加樣和儀器操作在自動檢測區(qū)進(jìn)行。這時候單獨(dú)設(shè)置試劑準(zhǔn)備區(qū)有些浪費(fèi)空間，建議可以考慮與其它試劑儲存功能區(qū)合并。另外，實驗室如果本身是傳統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)PCR實驗室，則可以將檢測盒儲存在試劑準(zhǔn)備區(qū)，在樣本制備區(qū)加樣，在擴(kuò)增區(qū)上機(jī)。但以上都只是折中，仍與李克強(qiáng)總理提到的“檢測時間短、無需實驗室的核酸快速檢測設(shè)備”仍有較大差距。真正的POC分子診斷應(yīng)該是無論空間，隨時隨地能夠開展的分子檢測。
圖1 賽沛的GeneXpert檢測系統(tǒng)
圖2 Biocartis的Idylla檢測系統(tǒng)
今年7月29日，李克強(qiáng)總理在國務(wù)院常務(wù)會議上再次指出“要調(diào)動各方力量，加快時間段、靈敏度高、操作簡便的產(chǎn)品研發(fā)上市”。相信，隨著國家政策的大力支持，及國內(nèi)外產(chǎn)品技術(shù)的不斷發(fā)展，臨床應(yīng)用經(jīng)驗的不斷積累豐富，真正的POC分子診斷時代一定會到來。
